کیت سنجش سیکل سلولی

Cell Cycle Analysis Kit

توضیحات

چرخه سلولی یک فرآیند پیچیده و بنیادی است که منجر به رشد و تقسیم سلول می‌شود. این چرخه شامل دو بخش اصلی اینترفاز و فاز میتوزی است.

اینترفاز

اینترفاز خود به سه مرحله G1 (Gap 1)، S (Synthesis)، و G2 (Gap 2) تقسیم می‌شود:

 :G1  در این مرحله، سلول رشد کرده و مواد مورد نیاز برای همانندسازی DNA را فراهم می‌کند.    

   :S  در این فاز، DNA همانندسازی شده و محتوای ژنتیکی سلول دو برابر می‌شود.

 :G2 پس از تکمیل همانندسازی DNA، سلول آماده شدن برای ورود به فاز تقسیم را آغاز می‌کند.

فاز میتوزی

در فاز M یا میتوز، هسته سلول تقسیم شده (کاریوکینز) و سپس سیتوپلاسم نیز بین دو سلول دختری تقسیم می‌شود (سیتوکینز). پس از اتمام چرخه‌سلولی ممکن است برخی ازسلولها به یک حالت سکون غیرتقسیمی (G0) وارد شوند تا با فعال‌سازی مناسب مجدداً وارد چرخه شوند.

تنظیم چرخه‌سلولی توسط مولکول‌های تنظیمی مانند سایکلین‌ها انجام‌می‌گیرد. این مولکول‌ها با هماهنگی دقیق، تضمین‌کننده پیشرفت صحیح مراحل مختلف هستند. اختلالات در تنظیم چرخه‌سلولی ممکن‌است منجر به سرطان شود؛ بنابراین مطالعه دقیق آن برای فهم پدیده‌های زیستی ضروری است.

سلول‌ها در مراحل مختلف چرخه‌سلولی بر اساس محتوای DNA خود شناسایی می‌شوند. در طول مرحله S، محتوای DNA ازn2 به4n  افزایش پیدا کرده و این سطح 4n در مراحل G2 و M حفظ شده تا پس از سیتوکینز دوباره به n2 برگردد. برای تعیین تجربی محتوای DNA سلولی، سلول‌ها را می‌توان با یک رنگ فلورسنت که توانایی اتصال به DNA را دارد، مواجه کرد. سپس شدت فلورسانس هر یک از سلول‌ها با استفاده از دستگاه فلوسیتومتری تحلیل ‌شود.

کیت آزمایشگاهی  Baran Cell Cycle Assay برای تعیین پیشرفت چرخه‌سلولی با استفاده از یک رنگ فلورسنت قرمز (Propidium Iodide)  جهت رنگ آمیزی DNA سلولی و آنالیز توسط دستگاه فلوسیتومتری طراحی شده است.

 Propidium iodide هم به RNA و هم به DNA متصل می‌شود، بنابراین آنزیم RNase A  نیز در این کیت گنجانده شده است تا RNA سلولی را تجزیه کند و رنگ‌آمیزی زمینه‌ای ناشی از RNA را در طول آزمایش کاهش دهد.